提要 三七正骨水1ml/kg腹注能非常显著地提高小鼠热板法和压尾法的痛阈,并能降低醋酸所致小鼠扭体反应的发生率,0.05ml/只外涂给药,也可显著降低小鼠压尾法痛阈。它能非常显著地降低巴豆油所致小鼠耳廊肿胀的程度。1ml/kg腹注与0.1ml/只外涂给药均能非常显著降低鸡蛋清所致大鼠足跖肿胀的程度。外涂给药能迅速促进瘀血的消散,且有明显的量效关系。
三七正骨水系在我国著名骨伤科老中医称如高祖传方“麝香正骨水”基础上进行研制的。在保留原方祛风止痛、舒筋活血功效基础上,加以革新,从而增强解痉镇痛、抗炎、消肿、活血祛瘀的作用,广泛应用于风湿痹痛、跌打损伤、骨折伤筋诸症。今将实验研究结果报告如下。
材 料
药品 三七正骨水,批号880902,福州屏由制药厂提供。该药以70%乙醇为溶剂。实验外涂给药时以生药液加70%乙醇配制成溶液。腹注给药时为无醇剂,以生药提取液加生理盐水配制成混悬液。临床应用浓度为23%三七正骨水,即每23g生药复方经提取配制成100ml的三七正骨水。
麝香正骨水 批号880902,福州屏由制药厂提供。配制方法同三七正骨水,作为三七正骨水之对照组。
动物 昆明种小鼠18—22g,24—28g;豚鼠600—700g,由福建中医学院动物房提供。SD大鼠120—220g。由中国科学院上海实验动物中心提供。
方 法 与 结 果
一、 镇痛作用
1、 对小鼠热板法痛阈值的影响,取体重18—20g雌性小白鼠50只,随机分为5组:生理盐水对照组(1ml/kg);吗啡对照组(10ml/kg);23%麝香正骨水对照组(1ml/kg);实验Ⅰ组(23%三七正骨水,1ml/kg)。实验Ⅱ组(11.5%三七正骨水,1ml/kg)。热板温度为55±0.5 C。给药后观察小鼠出现舔后足的潜伏期(S) ,分别记录15、30、60、90min痛反应时间。由表1可风三七正骨水具有非常显著的提高小鼠热板法痛阈的作用,且量效关系明显在60min和90min时作用强于麝香正骨水。
2、 小鼠扭体反应的影响 取体重8-22g小鼠50只,雌雄兼用,随机分为5组:生理盐水对照组;吗啡对照组;23%麝香正骨水对照组;实验Ⅰ组(23%三七正骨水);Ⅱ组(11.5%三七正骨水)。剂量同前,腹注给药后10min,再给予0.5%醋酸(0.2ml/只)腹注引起扭体反应 ,观察各组小鼠出现扭体反应时间(潜伏期)及20min内产生扭体反应的次数,与生理盐水组进行组间比较,结果如下。由表2可见三七正骨水能显著降低醋酸所致小鼠扭体反应的发生率。
3、 对小鼠压尾法痛阈值的影响
(1)腹腔注射给药 取体重18-23g小鼠40只,雄雌兼用,随机分为4组:生理盐水对照组;杜冷丁对照组(12ml/kg);23%麝香正骨水对照组;实验组(23%三七正骨水,lml/kg)。实验采意大利产Ugo-Basil小鼠压痛仪。给药前以压痛仪测定引起每只小鼠痛反应的刻度值。即将压痛仪加压块刀口压在小鼠根部1cm处,开启电源后,随着重量砝码在刻度尺上移动,逐渐增加重量,至小鼠出现嘶叫为止,从砝码走行的刻度尺上读出刻度值,作出痛反应指标。剔除过于敏感与迟钝的小鼠,随限腹注给药30min后,再测定小鼠出现嘶叫时的刻度值,以给药前后刻度值的差作为痛阈提高指标。由表3可知三七正骨水能明显提高小鼠痛阈。
(2)外涂给药 取体重18-22g小鼠50只,雌雄兼用,随机分为5组:生理盐水对照组;杜冷丁对照组(12mg/kg);70%乙醇对照组;23%麝香正骨水对照组;实验1组(23%三七正骨水);Ⅱ组(11.5%三七正骨水)。外涂给药均为0.05ml/只。测定给药前痛阈后(方法同前),分别在各小鼠尾部涂上药液。30min后,同法测定小鼠痛反应的刻度值。
二、 抗炎作用
1、 对小鼠巴豆油所致耳廓肿胀的影响
(1)腹腔注射给药 取体重24-28g雄骨小鼠50只,随机分为5组:生理盐水对照组;氢可对照组(15mg/kg);23%麝香正骨水对照组;实验Ⅰ组(23%三七正骨水);Ⅱ组(11.5%三七正骨水)。腹注给药为1ml/kg。30min后2%巴豆油混合致炎剂均匀地涂抹在小鼠左耳前后两面,每耳0.05ml。由后脱颈椎处死。齐耳根剪下两耳,用直径2mmR的开孔器,冲下两耳同一部位园耳片,分析天平称重。以给药侧与对照侧同工不同酬耳片重重的差为肿胀度 。结果如下,表5表明三七正骨水能显著抑制巴豆油所致炎剂。
(2)外涂给药 取体重为24-28g雄性小鼠60只,随机分为6组:生理盐水对照组;70%乙醇对照组;氢可对照组(15mg/kg)。23%麝香正骨水对照组;实验Ⅰ组(23%三七正骨水);Ⅱ组(11.5%三七正骨水)。外涂给药每只0.05ml。实验时左耳先涂2%巴豆油混合致炎剂,30min后将药液均匀地涂抹在左耳前后两面。氢可为腹注给药,10min后涂巴豆油。测定方法同前,结果可见三七正骨水外涂具有非常显著的抑制巴豆油所致炎症的作用,且量效关系明显。其作用强于麝香正骨水(P<0.01)。
2、 对大鼠足跖蛋清所致肿胀的影响
(1)腹腔注射给药 取体重150-220g大鼠50只,雌雄兼用。随机分为5组:生理盐水对照组;氢可对照组(20mg/kg);23%麝香正骨水1ml/kg;实验Ⅰ组(23%三七正骨水);Ⅱ组(11.5%三七正骨水)。腹注给药均匀1ml/kg,给药25min后的新鲜鸡蛋清0.1ml/只注入大鼠有足跖腹清下,以毛细管放大测量法分别测得注入蛋清后30min。1、2、3、4、5h大鼠足跖肿胀的程度 。以给药前后大鼠踝关节容积之差作为肿胀程度,结果可见30min至4h三七正骨水都能显著地减轻鸡蛋清所致大鼠足跖肿胀程度,且有明显的量效关系,其作用强于麝香正骨水。
(2)外涂给药 取体重120-160g大白鼠60只,雌雄兼用。随机分为6组:生理盐水对照组;70%乙醇对照组;氢可对照组,20mg/kg;23%麝香正骨水对照组;实验Ⅰ组(23%三七正骨水;Ⅱ组(11.5%三七正骨水)。先将新鲜鸡蛋清注入大鼠右跖腱膜下,每只0.1ml。30min后将药液涂右足,每只0.5ml,腹注氢可为20mg/kg。给药30min后以毛细血管放大测法测得大鼠右足肿胀程度再涂给药液一遍,0.5ml/只。分别测得1、2、3、4、5h大鼠右足跖肿胀程度,结果可见三七正骨水外涂给药从30min至3h均有明显的抑制大鼠足跖肿胀的作用,且量效关系明显。
三、 活血祛瘀作用
对豚鼠局部创伤性瘀斑的影响 取体重600-700g豚鼠50只,雌雄兼用,随机分为5组:生理盐水对照组;70%乙醇对照组;23%麝香正骨水对照组;实验Ⅰ(23%三七正骨水);Ⅱ组(11.5%三七正骨水),实验时,将豚鼠背部脱6×5cm 用老虎钳钳夹皮肤,用力逐渐增大,以造成皮下出血为度 (面积4×3cm )。1h后出现瘀斑,随即将药液均匀地涂抹瘀斑处,每只1ml,每日二次。每日观察瘀斑消散情况,测量剩余瘀斑面积,结果23%、11.5%三七正骨水,能非常显著地消退瘀斑面积,缩短瘀斑处,每只1ml,每日二次。每日观察瘀斑消散天数,并有明显的量效关系,两组间比较P<0.05。
讨 论 与 小 结
上述实验研究结果表明,三七正骨水腹腔注射与外涂给药,均能非常显著地提高小鼠压尾法痛阈,腹腔注射给药能非常显著地提高小鼠热板法痛阈及降低醋酸所致小鼠扭体反应的发生率,说明三七正骨水具有非常显著的镇痛作用。三七正骨水腹腔注射与外涂给药均能非常显著地降低巴豆油所致小鼠耳廊的肿胀程度及鸡蛋清所致大鼠足跖的肿胀程度。显示该药具有非常显著的抗炎作用与对照组麝香正骨水相比,功效有了提高。
福建中医学院 丁铭 张安桢* 王和鸣**
参考文献
[1][2]、张凤鸾等:中国药理学通报,1998(1):44
[3][4]、徐叔云等;《药理实验方法》,人民卫生出版社,1982:532,525
[5]姚权瑞:中国药理学通报,1987(5):297
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